Lyofilizovaný peptid je stabilní, nikoli nezničitelný. Prášek rozkládá chemie a tato chemie závisí na sekvenci. Článek Proč lyofilizovat? uvádí tři základní pravidla; tento článek jde o vrstvu hlouběji.
Proč se peptidy rozkládají
Manning a spolupracovníci popsali v časopise Pharmaceutical Research (2010) cesty, po kterých se peptidy a proteiny chemicky mění. Pro zásobu v laboratoři jsou nejdůležitější čtyři z nich:
- Oxidace. Postranní řetězce obsahující síru a aromatické postranní řetězce reagují s kyslíkem. Nejcitlivější jsou methionin, cystein a tryptofan.
- Deamidace. Asparagin a glutamin ztrácejí amidovou skupinu. Peptid získá záporný náboj a hmotnost vyšší přibližně o jednu jednotku.
- Hydrolýza. Voda rozštěpí vazbu v řetězci; peptid se rozpadne na kratší úseky.
- Výměna disulfidů. U peptidu s cysteiny se může můstek otevřít a znovu uzavřít na jiném místě. Hmotnost zůstane téměř stejná, struktura nikoli.
Která cesta se týká kterého peptidu, lze vyčíst ze sekvence. Tři příklady z tohoto sortimentu se sekvencemi, jak je uvádí PubChem:
- MOTS-c má dva methioniny (pozice 1 a 6) a tryptofan na pozici 3: tři místa náchylná k oxidaci.
- Oxytocin má disulfidový můstek mezi Cys1 a Cys6 a AOD-9604 mezi Cys7 a Cys14. U těchto dvou je výměna disulfidů bodem, na který je třeba dbát.
- BPC-157 nese dvě kyseliny asparagové vedle sebe na pozicích 10 a 11, motiv, který vyžaduje zvláštní péči i při syntéze.
Všechny čtyři cesty potřebují vodu, teplo nebo kyslík. Proto se skladování scvrkává na to, udržet mimo dosah právě tyto tři.
Teplota
Řiďte se teplotou uvedenou na etiketě a v certifikátu analýzy. U lyofilizovaného materiálu se doporučená teplota liší podle látky a podle dodavatele a obecný údaj z fóra nic neříká o vaší šarži. Pokud etiketa teplotu neuvádí, zeptejte se dodavatele a odpověď zapište do laboratorního deníku.
Jedno platí vždy: chladněji znamená klidněji. Každá chemická reakce probíhá při nižší teplotě pomaleji a prášek nemusí sledovat teplotní výkyvy laboratorního stolu.
Vlhkost a světlo
Lyofilizovaný peptid je hygroskopický: přitahuje vodu ze vzduchu a voda je předpokladem hydrolýzy a deamidace. Lahvičku proto udržujte uzavřenou a dobu, po kterou je otevřená, krátkou. Pokud je v balení sáček s vysoušedlem, nechte ho u lahvičky.
Studenou lahvičku nechte před otevřením dosáhnout pokojové teploty. Vzdušná vlhkost kondenzuje na studeném skle a tato vlhkost skončí v prášku. Materiál také uchovávejte v temnu: aromatické postranní řetězce, jako jsou řetězce tryptofanu a tyrosinu, pohlcují světlo, proto lahvičku nenechávejte na slunci ani pod lampou.
Zmrazování a rozmrazování
Pokaždé, když se lahvička ohřeje a znovu ochladí, dostává vlhkost příležitost kondenzovat a materiál prodělá další teplotní cyklus. Nevyndávejte proto z mrazničky celou zásobu, když potřebujete jednu lahvičku. Pokud pravidelně pracujete se stejnou šarží, je lepší materiál rozdělit na menší jednotky, aby zbytek zůstal nedotčen. Pokaždé, když lahvička opustí sklad, zapište datum; později pak uvidíte, kolik cyklů prodělala.
Převzetí zásilky
Zásilku zkontrolujte při doručení, dříve než materiál uložíte. Zjistěte, zda je obal neporušený, zda počet lahviček a gramáže odpovídají objednávce, zda číslo šarže na etiketě odpovídá certifikátu a zda je chladicí vložka ještě studená, pokud byla přiložena.
PulseChem zasílá lahvičky v izolovaném obalu s ochranným materiálem a za teplého počasí nebo při delší přepravě přidává chladicí vložku; to je popsáno na stránce Doprava a vrácení zboží. Na téže stránce je uvedeno, jak postupovat při poškození: nahlaste je do 48 hodin s číslem objednávky a fotografiemi obalu a produktu a obal si ponechte.
Lyofilizát, který se uvolnil nebo rozpadl, není poškození. Několik miligramů prášku je velmi málo materiálu a během přepravy se může odloupnout ode dna.
Evidence
Skladování lze ověřit, jen pokud je zapsáno. U každé lahvičky zaznamenejte:
- číslo šarže z etikety;
- datum převzetí a datum prvního otevření lahvičky;
- místo ve skladu s teplotou tohoto místa;
- datum analýzy z certifikátu a datum opakované zkoušky nebo datum použitelnosti, pokud je etiketa nebo certifikát uvádí.
Tak můžete výsledek později přiřadit k šarži, a když se něco odchyluje, zjistit, zda je příčinou materiál, nebo pokus. Certifikát k vaší šarži najdete na stránce produktu a na stránce Výsledky analýz.
K roztokům je zde třeba dodat jen jednu větu: jak dlouho zůstává roztok použitelný, závisí na látce a rozpouštědle, proto zaznamenejte, kdy byl připraven a jak byl uchováván. Tento článek neobsahuje žádné pokyny k přípravě; všechny produkty jsou určeny výhradně pro laboratorní výzkum in vitro (Vysvětlení RUO).
Další čtení: Proč lyofilizovat? o samotném sušení mrazem, Jak se peptidy vyrábějí? o původu nečistot a Jak číst hmotnostní spektrum o posunech hmotnosti, které provázejí oxidaci a deamidaci.
Zdroje
Navštíveno v listopadu 2026.
- Manning M.C., Chou D.K., Murphy B.M., Payne R.W., Katayama D.S. (2010), Stability of protein pharmaceuticals: an update, Pharmaceutical Research (PubMed), PMID 20143256: chemické cesty oxidace, deamidace, hydrolýza a výměna disulfidů
- MOTS-c (PubChem), CID 146675088: sekvence s methioninem na pozicích 1 a 6 a tryptofanem na pozici 3
- Oxytocin (PubChem), CID 439302: disulfidový můstek mezi Cys1 a Cys6
- AOD-9604 (PubChem), CID 71300630: disulfidový můstek mezi Cys7 a Cys14
- BPC-157 (PubChem), CID 9941957: sekvence s Asp10 a Asp11
Tento článek poskytuje základní informace o laboratorním výzkumu. Nejde o lékařskou radu ani o návod k použití. Všechny produkty jsou určeny výhradně pro výzkumné účely.
