Næsten alle forskningspeptider leveres som et tørt pulver i et hætteglas. Pulveret er lyofiliseret, dvs. frysetørret. Grunden er enkel: Et peptid nedbrydes i vand og næsten ikke i tør tilstand.
Hvad der går galt i opløsning
Vand muliggør en række nedbrydningsreaktioner:
- Hydrolyse. Bindingen mellem to aminosyrer brydes, og kæden falder fra hinanden.
- Oxidation. Især methionin, cystein og tryptofan reagerer med ilt.
- Deamidering. Asparagin og glutamin mister en amidgruppe, hvilket ændrer peptidets ladning.
- Aggregering. Kæder klumper sammen og udfældes.
Hvor hurtigt det sker, afhænger af sekvensen, pH-værdien og temperaturen. I et tørt pulver går disse reaktioner næsten i stå.
Frysetørring i tre trin
- Nedfrysning. Peptidopløsningen fryses. Vandet bliver til is.
- Primær tørring. Under vakuum går isen direkte over til damp uden først at smelte. Det kaldes sublimering.
- Sekundær tørring. Temperaturen hæves en smule for at fjerne det sidste bundne vand.
Da materialet aldrig er flydende og varmt på samme tid, forbliver peptidets struktur intakt. Tilbage er en let, porøs kage eller et tyndt lag i bunden af hætteglasset.
Sådan ser pulveret ud
Nogle få milligram peptid er meget lidt materiale. Hætteglasset kan se næsten tomt ud, eller pulveret kan sidde som en tynd film på glasset. Kagen kan også løsne sig eller smuldre under transporten. Intet af dette siger noget om kvaliteten. Mængden og renheden er angivet på analysecertifikatet.
Opbevaring
Lyofiliseret materiale har tre fjender: fugt, varme og lys.
- Hold hætteglasset lukket, køligt og mørkt. Følg opbevaringstemperaturen på etiketten.
- Lad et koldt hætteglas nå stuetemperatur, før du åbner det. Ellers kondenserer fugt fra luften på pulveret.
- Undgå gentagen opvarmning og afkøling.
Pulveret tiltrækker vand. Jo kortere tid et hætteglas står åbent, desto bedre.
Og derefter?
Når et peptid er opløst, gælder de ovenfor beskrevne nedbrydningsreaktioner igen. Hvor længe en opløsning forbliver brugbar, afhænger af stoffet og opløsningsmidlet. Notér i din laboratoriejournal, hvornår en opløsning blev fremstillet, og hvordan den blev opbevaret, så målinger senere kan spores tilbage.
Flere begreber fra denne artikel finder du i ordlisten.
En mere dybtgående gennemgang af opbevaring, nedbrydningsvejene pr. aminosyre og modtagelse af en forsendelse finder du i Opbevaring af peptider i laboratoriet.
Denne artikel giver baggrundsviden om laboratorieforskning. Den er hverken medicinsk rådgivning eller en brugsanvisning. Alle produkter er udelukkende beregnet til forskningsbrug.