Casi todos los péptidos de investigación se suministran como polvo seco en un vial de vidrio. Ese polvo está liofilizado, es decir, secado por congelación. La razón es sencilla: en agua, un péptido se deteriora; en seco, apenas lo hace.
Qué va mal en solución
El agua hace posibles varias reacciones de degradación:
- Hidrólisis. El enlace entre dos aminoácidos se rompe y la cadena se fragmenta.
- Oxidación. Reaccionan con el oxígeno sobre todo la metionina, la cisteína y el triptófano.
- Desamidación. La asparagina y la glutamina pierden un grupo amida, lo que cambia la carga del péptido.
- Agregación. Las cadenas se aglomeran y precipitan.
La velocidad a la que esto ocurre depende de la secuencia, del pH y de la temperatura. En un polvo seco, estas reacciones quedan prácticamente detenidas.
La liofilización en tres pasos
- Congelación. La solución de péptido se congela. El agua se convierte en hielo.
- Secado primario. Al vacío, el hielo pasa directamente a vapor sin fundirse antes. Esto se llama sublimación.
- Secado secundario. La temperatura se eleva ligeramente para eliminar los últimos restos de agua ligada.
Como el material nunca está líquido y caliente a la vez, la estructura del péptido se mantiene intacta. Lo que queda es una torta ligera y porosa o una capa fina en el fondo del vial.
Qué aspecto tiene el polvo
Unos pocos miligramos de péptido son muy poco material. El vial puede parecer casi vacío, o el polvo puede quedar como una película fina adherida al vidrio. La torta también puede desprenderse o desmenuzarse durante el transporte. Nada de esto dice nada sobre la calidad. La cantidad y la pureza figuran en el certificado de análisis.
Conservación
El material liofilizado tiene tres enemigos: la humedad, el calor y la luz.
- Conserve el vial cerrado, en lugar fresco y oscuro. Respete la temperatura de conservación indicada en la etiqueta.
- Deje que un vial frío alcance la temperatura ambiente antes de abrirlo. De lo contrario, la humedad del aire se condensa sobre el polvo.
- Evite el calentamiento y el enfriamiento repetidos.
El polvo atrae el agua. Cuanto menos tiempo permanezca abierto un vial, mejor.
¿Y después?
Una vez disuelto un péptido, vuelven a entrar en juego las reacciones de degradación descritas más arriba. Cuánto tiempo sigue siendo utilizable una solución depende del compuesto y del disolvente. Anote en su protocolo cuándo se preparó una solución y cómo se conservó, de modo que las mediciones sean trazables más adelante.
Encontrará más términos de este artículo en el glosario.
Para profundizar en el almacenamiento, las vías de degradación por aminoácido y la recepción de un envío, consulte Almacenamiento de péptidos en el laboratorio.
Este artículo contiene información de contexto sobre la investigación de laboratorio. No es asesoramiento médico ni son instrucciones de uso. Todos los productos son exclusivamente para investigación.