Auf fast jedem Produktdatenblatt ist eine Reinheit in Prozent angegeben. Die Zahl ist nützlich, sofern Sie wissen, was gemessen wurde.
Wie die Reinheit gemessen wird
Die Standardmethode ist die HPLC. Eine gelöste Probe läuft durch eine Säule, die ihre Bestandteile voneinander trennt. Ein Detektor misst, wie viel Licht jeder Bestandteil absorbiert, meist bei einer Wellenlänge von etwa 214 bis 220 Nanometern, bei der die Bindung zwischen den Aminosäuren absorbiert.
Das Ergebnis ist ein Chromatogramm: eine Linie mit Peaks. Die Reinheit ist die Fläche des Hauptpeaks, geteilt durch die Gesamtfläche aller Peaks. Bei 99 % stammt also 1 % des Signals von etwas anderem.
Was mit „etwas anderem“ gemeint ist
Verunreinigungen in einem synthetischen Peptid ähneln dem Produkt selbst oft stark:
- Ketten, denen eine Aminosäure fehlt;
- vorzeitig abgebrochene Ketten;
- oxidierte oder desamidierte Varianten;
- Reste von Schutzgruppen aus der Synthese.
Gerade weil sie dem Produkt ähneln, können sie in einem Experiment ebenfalls aktiv sein. Eine geringere Reinheit bedeutet mehr Unsicherheit darüber, was einen gemessenen Effekt verursacht.
Was die Zahl nicht aussagt
Nicht, wie viel Peptid im Vial ist
Ein lyophilisiertes Pulver besteht nicht nur aus Peptid. Es enthält auch Gegenionen, etwa Acetat, und etwas gebundenes Wasser. Der Anteil an tatsächlichem Peptid heißt Peptidgehalt und liegt in der Regel zwischen 70 und 90 Gewichtsprozent. Ein Pulver kann also zu 99 % rein sein und zu 80 % aus Peptid bestehen. Die eine Zahl beschreibt die Zusammensetzung des Peptids, die andere die Zusammensetzung des Pulvers.
Nicht, um welche Verbindung es sich handelt
Die HPLC zeigt, dass es einen Hauptbestandteil gibt, aber nicht, was dieser Bestandteil ist. Dafür ist die Massenspektrometrie nötig. Deshalb gehören Reinheit und Identität zusammen auf ein Analysenzertifikat.
Nichts über Sterilität oder Endotoxine
Ein Chromatogramm erfasst weder Bakterien noch Endotoxine. Dafür gibt es gesonderte Tests.
Zahlen vergleichen
Das Ergebnis hängt von der Methode ab. Ein kurzer Lauf mit steilem Gradienten trennt schlechter als ein langer und kann eine Verunreinigung unter dem Hauptpeak verbergen. Vergleichen Sie Prozentwerte deshalb nur, wenn Sie die Messbedingungen kennen, und sehen Sie sich das Chromatogramm selbst an.
Wann es auf 99 % ankommt
Für ein qualitatives Experiment reichen 95 % oft aus. Bei quantitativen Arbeiten, etwa einer Dosis-Antwort-Kurve in einem Zellmodell oder einem Bindungsassay, sollen möglichst wenige Störfaktoren im Spiel sein. Dann ist eine hohe Reinheit kein Luxus.
Bei PulseChem wird eine Charge ab einer HPLC-Reinheit von ≥ 99 % freigegeben. Der gemessene Wert Ihrer Charge steht auf dem zugehörigen Zertifikat, das Sie auf der Seite Laborergebnisse finden. Siehe auch den Laborstandard.
Dieser Artikel enthält Hintergrundinformationen zur Laborforschung. Er ist keine medizinische Beratung und keine Gebrauchsanweisung. Alle Produkte sind ausschließlich für Forschungszwecke bestimmt.